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固定破膜对细胞表面抗体结合的影响

作者：杭州联科生物技术股份有限公司 2015-01-21T22:04 (访问量:4070)


有些时候，表面抗体需要在细胞固定之后标记，但这取决于固定过程对于要研究的蛋白是否会产生影响。

下表列出了eBioscience的几种固定过程，包括使用 Intracellular Fixation & Permeabilization Buffer Set (cat. no. 88-8824) 或者 IC Fixation Buffer (cat. no. 00-8222) 加甲醇处理，对于标记的影响状况。

Antibody Clone Performance Following Fixation / Permeabilization

Antigen

Clone

Live cells (Before IC Fixation)1

After IC Fixation and Perm Wash1

After IC Fixation/ Methanol2

HUMAN

CD3

OKT3

+++

++

+

UCHT1

+++

+++

+++

SK7

+++

++*

+++

CD4

OKT4

+++

+*

+/-

RPA-T4

+++

+++*

+

SK3

+++

+++

+

CD5

UCHT2

+++

+++

+++

CD8

OKT8

+++

+/-

-

RPA-T8

+++

+++

+/-

SK1

+++

+++*

+/-

CD8b

SIDI8BEE

+++

++

++

CD11a

HI111

+++

+++

+

CD11b

CBRM1/5

+

-

+++

ICRF44

++

-

++

CD11c

3.9

++

+*

++

CD14

61D3

+++

+++*

++

CD19

HIB19

+++

++*

+/-

CD20

2H7

+++

+++

-

CD25

BC96

+

-

+/-

CD27

O323

+++

+*

+

CD31

WM59

+++

++*

+++

CD33

p67.6

+++

+++*

+++

CD38

HB7

++

-

++

HIT2

++

-

++

CD40

5C3

++

-

++

CD44

IM7

+++

+++

+++

CD45

2D1

+++

+++

+++

HI30

+++

+++

+++

CD45RA

HI100

+++

+++

+++

CD45RO

UCHL1

+++

+++

++

CD62L

DREG-56

++

-

++

CD56

MEM-188

+

-

+/-

CB56

+

-

+/-

CMSSB

++

+/-*

-

CD57

TB01

++

++

++

CD62L

DREG56

++

-

CD69

FN50

+++

++

++

CD80

2D10.4

+

-

+

CD83

HB15e

++

++

++

CD86

IT2.2

+

+*

+

CD94

HP-3D9

++

++

++

CD95

DX2

+

-

+

CD127

RDR5

++

+*

++

CD161

HP-3G10

++

++*

+

MOUSE

CD3

145-2C11

++

+

+/-

500A2

+++

+++*

+++

17A2

+++

+++

+++

CD4

GK1.5

+++

++*

+++

RM4-5

+++

+++*

+++

CD8

53-6.7

+++

++

++

CD11b

M1/70

++

++

++

CD11c

N418

+++

+++

++

CD19

1D3

+++

++*

-

MB19-1

++

-

-

CD24

M1/69

+++

+++

++

CD25

PC61.5

+

-

+

3C7

++

-

+

7D4

++

++

+

CD39

24DMS1

+

-

++

CD44

IM7

++

++*

++

CD45

30-F11

+++

+++

+++

CD45R(B220)

RA3-6B2

+++

++

+++

CD49b

DX5

++

-

+

CD69

H1.2F3

++

-

-

CD185(CXCR5)

SPRCL5

++

-

-

GR-1

RB6-8C5

+++

+++

++

NK1.1

PK136

++

+

+

IgD

11-26c

+++

+++*

++

IgM

ll/41

++

++*

++

TCR beta

H57-597

++

++*

++

RAT

CD25

OX39

+

-

CANINE

CD4

ykix302.9

+++

+

CD5

ykix322.3

+++

-

CD8a

ycate55.9

+++

++

CD44

ykix337.8

+++

++

CD45

ykix716.13

+++

++

CD45R

ykix753.22

+++

++

CD90

ykix337.217

+++

++

MHC Class II

ykix334.2

+++

+++

1 Testing carried out with eBioscience Fixation & Permeabilization Kit for 15-30 minutes at room temperature followed by a Perm wash, see Best Protocols here (Protocol A).

*Please note the clones with * indicate longer fixations are detrimental to staining.

2 Testing carried out with 15-30 minutes at room temperature in 50% IC Fixation followed by 30 minutes 90-100% Methanol incubation on ice, see Best Protocolshere (Protocol C).




阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015010021.html

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